【摘 要】
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目的采用实时荧光定量PCR(RFO-PCR)技术分析儿童非何杰金淋巴瘤患儿外周血APRIL及其受体mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标.
【机 构】
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南通大学附属医院,南通,226001
【出 处】
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2006年急诊医学学术研讨会暨《中华急诊医学杂志》第五届组稿会
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目的采用实时荧光定量PCR(RFO-PCR)技术分析儿童非何杰金淋巴瘤患儿外周血APRIL及其受体mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标.
方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因中APRIL和BCMA的水平.
结果RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109pg/ml～101pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数v分别为1.68％～5.97％和6.40％～10.58％.22例儿童非何杰金淋巴瘤样本的APRIL及其受体BCMA和TACImRNA水平的表达水平均显著高于正常儿童(p＜0.05).
结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;而且发现APRIL在儿童非何杰金淋巴瘤的发病过程中可能起了重要作用,并通过受体BCMA和TACI发挥作用.
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