重组水蛭素Ⅲ的分离纯化和鉴定

来源 :2004年全国生物技术学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shmily8318
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对大肠杆菌生产的重组水蛭素Ⅲ发酵液进行三个步骤的纯化,选出最佳分离纯化条件.首先将分泌到培养基上清液中的水蛭素进行大孔吸附树脂层析,再用DEAE纤维素离子交换层析分离,最后用制备型反相高效液相色谱层析,经真空冷冻干燥得到水蛭素成品.对收集液进行SDS-PAGE分析,各步纯化产物均达到电泳纯100%;经分析型反相高效液相色谱分析,成品纯度大于反相纯95%;经质谱鉴定,成品分子量约为6920,确为重组水蛭素Ⅲ。
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