黄曲霉毒素降解酶产生菌的筛选及酶解效果研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kpqkxx03592
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  根据联合国粮农组织(FAO) 2002年资料,世界上约有25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染,而危害饲料较严重的当属黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1).动物在采食含有不同剂量AFB1的日粮时,将表现为生长受阻、采食量减少、饲料利用率降低、免疫抑制、肝损伤等不同症状,严重时可导致动物死亡.因而,寻找有效的方法来降低或消除霉菌毒素的危害,变得越来越重要.目前,消除霉菌毒素的方法主要有物理、化学和生物学方法,但最有效的方法当属生物酶解法.本研究将不同来源的材料稀释100倍后,以AFB1作为唯一碳源和能源进行AFB1降解菌株的初筛(AFB1浓度100μl/ml),然后接种于涂布有100μl AFB1的复筛PDA培养基中,以菌株的生长情况作为初筛的依据.最终发现一株在AFB1培养基上生长良好的真菌,经26S rDNA分析,确认为米曲霉.该真菌经固体发酵培养后,经高速离心获得粗酶液,而后经盐析、透析和凝胶层析,获得不同分子量的酶蛋白.在不同的酶液中加入AFB1,使其在体系中的最终浓度为50μg/L,置于30℃恒温振荡培养48h,取样测定其中AFB1的含量.结果表明,蛋白分子量约为33.7kDa的AFB1降解酶对AFB1降解效果最好,对AFB1的降解率最高可达77.05%,为AFB1的生物降解研究奠定了基础.
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