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研究背景:肿瘤微环境作为肿瘤发生的"土壤"是近年来该领域研究前沿热点之一。肿瘤细胞通过产生大量膜型和分泌型生物活性物质(Tumor-derived factors,TDFs)诱导基质和相关免疫细胞功能转化,形成稳定的肿瘤免疫微环境,保护肿瘤组织逃脱机体的免疫监视并促进肿瘤的转移。B淋巴细胞是在机体体液免疫中发挥关键作用的免疫细胞,其在肿瘤微环境中发挥功能的研究相对较少。目前,多种具有免疫抑制功能的B细胞亚群在肿瘤的发生、发展及转移中发挥了重要作用。目的 :研究肿瘤驯化的B细胞及其所分泌的病理性抗体在肿瘤转移前微环境形成从而促进肿瘤转移的相关机制。研究方法 :为研究肿瘤驯化下的淋巴结微环境对于肿瘤转移的影响,我们制备了小鼠乳腺癌4T1原位种植模型,流式分析肿瘤引流淋巴结中各淋巴细胞群体尤其是B细胞数量及比例的变化;利用流式细胞术、ELISA、基因芯片等技术对肿瘤驯化的B细胞进行表型鉴定;体内实验部分,我们应用B细胞缺陷u MT-/-小鼠进行原位乳腺癌细胞种植,并对荷瘤小鼠给予不同来源Ig G回输,从而观察B细胞及病理性抗体对于肿瘤转移的促进功能。研究结果 :我们研究发现肿瘤影响下的DLN中B细胞比例及数量显著增加。表型分析显示,这群肿瘤驯化的B细胞分泌抗体的能力明显增强,尤其是Ig G1、Ig G2a及Ig G2b。对荷瘤小鼠体内病理性Ig G研究显示其具有肿瘤抗原特异性。体内功能试验证实,B细胞缺失以后,荷瘤小鼠淋巴结转移明显减少,而回输了病理性Ig G的小鼠其肿瘤转移的能力显著增强。进一步机制研究表明,病理性Ig G能够通过结合肿瘤抗原Hspa4,激活下游NF-κB通路,从而上调Hif1α及Cox2的表达。Hif1α的表达促进肿瘤细胞表达趋化因子受体CXCR4,而Cox2介导的PGE2分泌则诱导淋巴结基质细胞分泌趋化因子SDF1α,从而促进肿瘤转移前微环境形成并诱导肿瘤细胞向引流淋巴结的迁移。结论 :本课题研究发现在乳腺癌发展过程中,肿瘤驯化的B细胞及其分泌病理性抗体能够促进肿瘤淋巴结转移。我们的研究证实在肿瘤免疫调控中,B细胞不仅能够通过分泌IL-10和TGFβ发挥负向免疫调控作用而且能够通过产生病理性抗体参与肿瘤转移前微环境的形成诱导肿瘤转移。