双孢蘑菇凝集素的原核表达、纯化及凝血活性检测

来源 :2012年中国菌物学会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyzw98
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  根据已报道的双孢蘑菇凝集素基因序列设计引物,以总DNA为模板扩增了双胞蘑菇凝集素基因。其中长432bp的基因亚型克隆后连接至携带His标签的原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot印迹鉴定,并用兔红细胞凝集试验检测其生物学活性。结果表明重组表达质粒pET-L1构建正确;重组蛋白纯化后纯度达95%以上,且具有良好的红细胞凝集活性。
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