【摘 要】
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研究背景:TdT interacting factor 1(TdIF1,末端脱氧核苷酸转移酶相互作用因子)是一种直接结合terminal deoxynucleotidyltransferase(TdT,末端脱氧核苷酸转移酶)的蛋白质。T
【机 构】
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南昌大学基础医学院; 江西省医学科学院;
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研究背景:TdT interacting factor 1(TdIF1,末端脱氧核苷酸转移酶相互作用因子)是一种直接结合terminal deoxynucleotidyltransferase(TdT,末端脱氧核苷酸转移酶)的蛋白质。TdIF1在体外可抑制TdT活性,TdIF1通过从细胞质招募BPOZ-2到细胞核增强TdT泛素化,而泛素化的TdT本身抑制TdT活性。此外,在非免疫组织中,TdIF1起着转录因子的作用。本实验室前期研究表明,TdIF1在多种肿瘤中呈高表达,提示TDIF1具有肿瘤促进作用。然而,其在调控肿瘤生长的作用尚未阐明,TdIF1在肺腺癌中的作用尚无报道。目的 :在人肺腺癌细胞A549中下调TdIF1的表达,观察其表达下调对细胞增殖和凋亡的影响。方法 :合成TdIF1特异性的siRNA 3对,随机siRNA阴性对照1对,siRNA-GAPDH1对;将合成好的siRNA分别转染人肺腺癌细胞株A549,运用qPCR和Westernblot方法筛选出具有最佳沉默效率的siRNA;用CCK8法检测转染前后肿瘤细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测肿瘤细胞周期和凋亡情况。结果:siRNA-TdiF 1可有效下调TdIF1的表达;CCK8结果显示TdIF1的表达下调可显著抑制肿瘤细胞增殖;流式检测结果显示,TdIF1的表达下调可显著抑制肿瘤细胞周期进展,G1期明显延长,且凋亡细胞明显增加。结论 :TdIF1在人肺腺癌细胞A549增殖,细胞周期和细胞凋亡调控中发挥重要作用,提示TdIF1可能作为肺癌治疗的有效靶分子。
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