【摘 要】
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目的：本研究利用人羊膜(AM)制备一种能用于快速扩增和移植表皮细胞的具有完整基底膜和良好生物稳定性的真皮支架.方法和结果：以反复液氮冻融和DNase酶消化的方法处理新鲜羊
【机 构】
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200433,第二军医大学附属长海医院烧伤科
【出 处】
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第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会
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目的：本研究利用人羊膜(AM)制备一种能用于快速扩增和移植表皮细胞的具有完整基底膜和良好生物稳定性的真皮支架.方法和结果：以反复液氮冻融和DNase酶消化的方法处理新鲜羊膜,能在有效去除上皮和间质细胞成分的同时保留羊膜完整的基底膜结构；层粘连蛋白、Ⅳ、Ⅵ和Ⅶ型胶原连续均匀分布于脱细胞羊膜(AAM)的基底膜部位.随后将AAM用碳二亚胺(EDC,0.05mmol/mg)分别交联5分钟、30分钟和6小时,发现随交联时间延长AAM的机械强度和生物稳定性逐渐增强,但对表皮细胞的毒性也随之增大.交联5分钟的AAM无明显细胞毒性、体内外组织相容性良好；在其表面种植表皮细胞培养7和14天后细胞相对增殖率分别为367±33％和631±43％,显著高于常规培养皿(294±30％和503±41％,p＜0.05)； P63阳性细胞的比例也明显高于常规培养皿组(54.32±4.27％vs 33.32±3.18％,P＜0.05).将表皮细胞在交联AAM表面培养14天并移植于裸鼠的全层皮肤缺损创面后,表皮细胞成活并形成类似正常皮肤的表皮.新生表皮比单纯表皮膜片移植和空白对照组明显增厚,且真皮重建良好,基底膜厚而完整,创面收缩率明显改善.结论：反复冻融脱细胞化和EDC适度交联的羊膜具备完整的基底膜结构、良好的可操作性和生物稳定性,可促进人表皮细胞的体外快速扩增,移植后有助于重建真皮结构,是理想的真皮支架材料.
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