猪细小病毒VP2蛋白主要抗原表位基因的原核表达及应用

来源 :中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lawfocus
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将构建好的重组质粒PET-VP2转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了PPVVP2基因的高效表达.通过Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有良好的免疫学活性.表达产物经HisBind层析柱纯化后作为诊断抗原初步建立了检测PPV抗体的间接ELISA方法.结果表明:抗原的最佳包被浓度为3.5μg/ml,血清的最佳稀释度为1:40,待检血清阳性标准初步定为OD490>0.51,且OD待检血清/OD阴性血清>2.1。
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