目的：从免疫原性上探讨中药药性的物质基础. 方法：以高良姜、肉桂与仙茅3味典型热性中药水提物的混合品作为热性对照抗原，以黄连、大黄与知母3味典型寒性中药水提物的混合品作为寒性对照抗原，免疫家兔后，制备相应多克隆抗体，分别应用寒、热性对照抗原抗体与9味中药水提物作斑点免疫印迹，杂交信号应用Quantity One定量扫描分析. 结果：9味中药与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为：干姜、附子、杜仲、秦皮、金银花、知母、黄连、大黄、黄柏；与热性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为：57.33%，43.56%、34.16%、30.2%、28.81%、26.53%、21.68%、17.62%、14.85%；9味中药与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号大小顺序为：大黄、知母、黄连、黄柏、干姜、金银花、秦皮、杜仲，附子；与寒性对照抗原多克隆抗体的印迹信号相似度分别为：55.22%、54.23%、46.72%、34.08%、30.3%、24.48%、24.33%、20.35%、15.17%。以印迹信号相似度为聚类变量，经Wistar’s Method聚类分析，9味中药被聚为2大类，一大类为：黄柏、知母、黄连、大黄.该大类与寒性对照抗原距离小，与寒性对照抗原的距离依次增大；另一大类为：干姜、附子、杜仲、秦皮，金银花.该大类与热性对照抗原距离小，与热性对照抗原的距离依次增大. 结论：中药药性的物质基础存在一定的规律性，总体上，测试中药与对照抗原抗体的印迹信号相似度越小，其药性与对照抗原的距离越大；斑点免疫印迹法是中药药性物质基础研究的一种实用、有效的新方法。