【摘 要】
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目的：研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法：(1)培养人骨肉瘤U2-OS细胞.(2)筛选对骨肉瘤U2-OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清。(3)在倒置相差显微镜和光镜下观察骨肉瘤U2-OS细胞形态，用MTT法测细胞活力·(4)原位末端标记：骨肉瘤细胞胰酶消化置于左旋多聚赖氨酸铺片上至细胞贴壁；在超净台内风干，室温固定25min。PBS通透液促渗5min，滴加Equilibrati
【机 构】
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福建省人民医院骨科,福建福州,35003 福建医科大学附属第一医院,350004
【出 处】
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中国中西医结合学会脊柱医学专业委员会2008年学术会议
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目的：研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。
方法：(1)培养人骨肉瘤U2-OS细胞.(2)筛选对骨肉瘤U2-OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清。(3)在倒置相差显微镜和光镜下观察骨肉瘤U2-OS细胞形态，用MTT法测细胞活力·(4)原位末端标记：骨肉瘤细胞胰酶消化置于左旋多聚赖氨酸铺片上至细胞贴壁；在超净台内风干，室温固定25min。PBS通透液促渗5min，滴加Equilibration Buffer100 μ1覆盖细胞。含rTdT酶的TUNEL反应液37℃，湿润避光反应60分钟。新鲜配制DAB工作液显色反应，光镜观察。(5)提取基因DNA，将10uDNA样品加入2μ1的10×LoadingBurffer，混匀，立即加到含有0.4μg/ml溴化乙啶的1％琼脂糖凝胶电泳，室温，1小时.紫外线灯下观察，凝胶成像系统扫描存盘。以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。
结果：实验组TUNEL检测阳性，琼腊糖凝胶电泳出现DNA的片段化，随着作用时间延长和浓度增加，凋亡率增高；电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚，细胞表面出现凋亡小体。
结论：中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用.
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