【摘 要】
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Dicer蛋白是RNA干扰机制(RNAi)的关键组分,它能识别dsRNA,并将其剪切为siRNA,引发RNAi机制。本文通过草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)感染草鱼肾细胞(CIK),在
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院,国家水生动物病原库,上海201306
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Dicer蛋白是RNA干扰机制(RNAi)的关键组分,它能识别dsRNA,并将其剪切为siRNA,引发RNAi机制。本文通过草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)感染草鱼肾细胞(CIK),在感染第4、8、12、16、20、24和28小时收集CIK细胞样品并提取细胞RNA,进行半定量PCR和实时定量(Real-time) PCR实验。通过不同时间点的表达分析,确认Dicer基因在病毒感染不同时间点的转录水平的表达量。通过对CIK细胞进行pEGFP-N1及人工合成EGFP的siRNA的转染分析,人工合成的EGFP的siRNA能在CIK细胞内完成RNAi作用和机制。另外通过对GCRV感染的CIK细胞进行pEGFP-N1及人工合成EGFP的siRNA的转染分析,证实GCRV的感染对细胞内RNAi的作用具有一定的抑制作用。
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