【摘 要】
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目的：探索磁共振成像技术检测人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子靶向转录活性的可行性.方法：构建慢病毒Lenti-hTERT-Fth-flag-Puro 和对照Lenti-CMV-Fth-flag-Puro 载体,将上述载体分别转染端粒酶阳性的肺腺癌(A549)和端粒酶阴性的原代人牙周膜成纤维(human periodo
【出 处】
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中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会
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目的：探索磁共振成像技术检测人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子靶向转录活性的可行性.方法：构建慢病毒Lenti-hTERT-Fth-flag-Puro 和对照Lenti-CMV-Fth-flag-Puro 载体,将上述载体分别转染端粒酶阳性的肺腺癌(A549)和端粒酶阴性的原代人牙周膜成纤维(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLFs)细胞.进行免疫荧光染色和Western blot 检测细胞Fth-flag 表达情况,采用普鲁氏蓝铁染色检测细胞摄铁量,MR扫描观察细胞T*2 WI信号和T*2值改变.结果：A549 细胞转染Lenti-hTERT-Fth-flag-Puro 载体后,检测结果显示转染细胞表达Fth-flag 蛋白,未转染细胞不表达Fth-flag 蛋白,普鲁氏蓝铁染色示转染细胞摄铁量较未转染细胞显著增加,MR扫描显示转染细胞T*2 WI 信号 和T*2值 较未转染细胞显著降低(P ＜0.05)； HPDLFs 细胞转染Lenti-hTERT-Fth-flag-Puro 载体后,细胞无Fthflag蛋白表达,细胞摄铁量较未转染细胞无变化,T*2 WI 信号 和T*2值 较未转染细胞T*2 WI 信号和T*2值 无显著差异(P ＞0.05).而转染对照Lenti-CMV-Fth-flag-Puro 慢病毒载体后,A549 和HPDLFs 细胞均表达Fth-flag 蛋白,转染细胞摄铁量较未转染细胞均显著增加,转染细胞T*2 WI信号和T*2值均比未转染细胞显著下降(P＜0.05).结论：MR铁蛋白报告基因成像技术可用于检测hTERT 启动子转录活性,构建的慢病毒载体有望为恶性肿瘤的靶向诊断提供一种新的方法.
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