酶免疫测定中酶标记抗体保存条件的研究

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酶免疫测定在疾病诊断与监测方面已被广泛采用.酶标记抗体也已趋于商品化。为了获得准确的测定结果.酶标记抗体的免疫学活性和酶活性至关重要。为此,我们对酶标记抗体的保存条件进行了研究。将不同动物的IgG按常规方法纯化,然后用辣根过氧化物酶标记。将标记物以硫酸铵沉淀.或50%甘油溶液、冻干等形式保存于不同温度下.并对该标记物定期测定其免疫学活性和酶活性。结果表明.硫酸铵沉淀方式的标记物.4℃保存条件最佳.如此保存两年,其免疫学活性保持91%.酶活性保持92%.在ELISA中呈现很好的重复性.自凝度很低.且硫酸铵对ELISA无干扰。如果提高保存温度.酶活性比免疫学活性更易丧失.在相同温度下.硫酸铵沉淀保存法对保证酶标记抗体的活性方面明显优于其它保存方法.4 ℃保存的标记物.其酶活性与免疫学活性的半衰期为9年。标记物的酶活性与免疫学活性在25 ℃的温度条件下.短期内稳定性也较好.标记物在37 ℃保存40天后.由于自凝作用而致酶活性丧失60%,ELISA本底增高.但免疫活性保持不变.总之.酶标记抗体硫酸铵沉淀保存法4 ℃条件下为最理想的保存条件。
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