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目的：建立快速、灵敏的液相色谱-质谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定血浆中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度。
方法：血浆样品以加替沙星为内标采用甲醇直接沉淀蛋白法萃取，采用C1色谱柱(250mm×4.6mm，5.0μm，Welch materials，USA)，流动相为0.05%甲酸溶液-甲醇(v/v)梯度洗脱，流速1.0mL·min-1，柱温25℃，进样量20uL，采用ESI多反应选择离子检测(MRM)。
结果：异烟肼在0.18~9.0μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9998)，利福平在0.8～40μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9997)，左氧氟沙星在0.09~4.5μg/mL范围内线性良好(r=0.9988)，萃取回收率均在75%以上，方法回收率在85%~115%之间，日内、日间精密度RSD均小于8.6%(n=5)。
结论：该方法专属性强、灵敏准确，适用于同时测定人血浆样品中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度。