PTD与牛体细胞重编程诱导因子的融合表达载体构建及其原核表达研究

来源 :第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingmx2008
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2006年iPS技术的诞生标志着生命科学新的里程碑.为了避免体细胞重编程过程中,病毒载体携带的外源基因整合进靶基因组所带来的潜在危险,本研究小组曾构建了原核表达载体pProEx-HTa/TAT-人转录因子(OISIM/K)融合表达载体,转化大肠杆菌细胞,经IPTG诱导表达后,获得并纯化了TAT转录因子融合蛋白。并且发现这些融合蛋白可以跨膜进入到细胞内,但只有极其少量的蛋白,到达了细胞核内,而大部分的蛋白包裹于靶细胞的内含体内呈点状分布于细胞质。在本研究中,在融合表达载体的C端和N端分别添加了均有跨膜转导功能的TAT和9R,以期实现更加高效的跨细胞膜和核膜作用,将转录因子带入到靶细胞的细胞核,实现转录因子蛋白直接重编程,为家畜iPS研究提供科学资料。
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