感染/炎症对未成熟脑星形细胞增殖和胶质化行为的研究

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目的探讨感染/炎症对未成熟星形细胞增殖和胶质化的影响以及TLR-4、NF-κBp65和细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达特点以及Notch1信号的表达变化。方法以不同浓度脂多糖(LPS:1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)刺激不同时间(1、3、7天)后,免疫荧光法检测星形细胞GFAP+/BrdU+的表达变化,观察星形细胞增值活性的变化,ELISA法检测星形细胞培养液细胞因子(TNF-α、IL-1β)浓度变化,同时荧光定量RT-PCR法检测LPS刺激后星形细胞TLR-4、NF-κB以及细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达变化,以及Notch1、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。结果 LPS(10μg/mL)刺激早期GFAP+/BrdU+细胞数与对照组比较减少(P<0.05),而LPS(5μg/mL)刺激后GFAP+/BrdU+细胞数较对照组增加(P<0.05)。LPS(5μg/mL)刺激早期星形细胞培养液TNF-α、IL-1β浓度较对照组升高明显(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激1天时星形细胞TLR-4mRNA表达较对照组降低明显(P<0.05),而LPS(5μg/mL)刺激3天时星形细胞TLR-4 mRNA表达升高(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激3天时星形细胞NF-κBp65 mRNA表达减少(P<0.05),而LPS(5μg/ml和10μg/mL)刺激7天时NF-κBp65 mRNA表达均较对照组升高(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激后星形细胞Notch1 mRNA表达较对照组下降(P<0.05),但LPS(10μg/mL)刺激1天、LPS(5μg/mL)刺激7天时Notch1 mRNA表达升高(P<0.05)。LPS(10μg/mL)刺激1天、LPS(1μg/mL)刺激7天时Hes1 mRNA表达减少(P<0.05),而LPS(1μg/mL)刺激早期星形细胞Hes5 mRNA表达增加与对照组比较有明显差异(P<0.05)。结论不同的感染/炎症条件下对未成熟星形细胞的增值活性影响是不同的,LPS刺激后星形细胞细胞因子(TNF-α、IL-1β)存在短暂的表达增加现象,且不同的感染/炎症条件下TLR-4/NF-κB及Notch1/Hes信号的表达特点是不同的。
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