【摘 要】
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本研究首先分离克隆了拟南芥编码酰胺酶At4g34880基因编码区上游1.5 kb的启动子区域,设定为AmidP,将AmidP与Gus报告基因融合并转入拟南芥,系统分析该启动子的时空表达模式.GUS染色结果显示1.5 kb的AmidP启动子具有叶脉特异表达特性,将该启动子分成不同区段构建与Gus报告基因融合的表达载体,导入拟南芥,分析表明一段长为176bp(-1500 ～-1324)的区域是导致Am
【机 构】
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浙江大学农业生物技术学院,浙江杭州,310058;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,浙江省植物代谢基因工程重点实验室,浙江杭州,310021
【出 处】
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中国作物学会油料作物专业委员会第七次会员代表大会暨学术年会
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本研究首先分离克隆了拟南芥编码酰胺酶At4g34880基因编码区上游1.5 kb的启动子区域,设定为AmidP,将AmidP与Gus报告基因融合并转入拟南芥,系统分析该启动子的时空表达模式.GUS染色结果显示1.5 kb的AmidP启动子具有叶脉特异表达特性,将该启动子分成不同区段构建与Gus报告基因融合的表达载体,导入拟南芥,分析表明一段长为176bp(-1500 ～-1324)的区域是导致AmidP启动子在转基因拟南芥中叶脉特异表达的关键所在,将该区域定义为VASCULAR VEIN ELEMENT(VVE)域,该功能域拷贝数的增加能增强叶脉表达强度.进而,在详细分析VVE功能域顺式作用原件的基础上,依次构建VVE功能域5 端和3′端缺失与-65 CaMV 35S融合驱动Gus报告基因表达载体,导入拟南芥中,结果显示该区域中一11bp的DOF2顺式作用原件起最主要作用,其它一些原件也与叶脉特异表达的特异性或表达强度相关.
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