【摘 要】
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目的:研究细胞外基质磷酸化糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)增殖与成牙本质分化能力的影响,探讨其在牙髓损伤修复中的功能.方法:以腺病毒介导的Ad5-MEPE-EGFP转染hDPCs 1、3、7、10 d后,CCK-8法检测细胞增殖情况;转染hDPCs 7、14
【机 构】
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510055广州,中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院·口腔医学研究所
【出 处】
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广东省口腔医学会第三次会员代表大会暨第十次学术会议
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目的:研究细胞外基质磷酸化糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)增殖与成牙本质分化能力的影响,探讨其在牙髓损伤修复中的功能.方法:以腺病毒介导的Ad5-MEPE-EGFP转染hDPCs 1、3、7、10 d后,CCK-8法检测细胞增殖情况;转染hDPCs 7、14、21 d后,实时荧光定量RT-PCR检测BSP、DSPP、OCN、Collagen Ⅰ mRNA表达水平,Von Kossa染色观察矿化结节形成情况;Superarray骨再生PCR芯片技术检测转染7d后成骨向分化相关基因表达的差异.结果:CCK-8结果显示转染1、3d后实验组A值均高于未转染组,3d有统计学意义(P<0.05),随后A值降低且低于未转染组,10 d时有统计学差异(P<0.05);转染后各目的基因表达量均较未转染组上调,BSP mRNA在14 d时表达最高,DSPP、OCN、Collagen Ⅰ mRNA在7d时最高,且均较另外两个时间点(14 d和21 d)显著性上调(P<0.05);Von Kossa染色示Ad5-MEPE-EGFP转染组出现大小不等的褐色矿化结节,21 d时矿化结节数量最多,结节体积最大.转染7d时,矿化与黏附相关基因(ENAM、CDH1、AHSG、MMP10、ICAM1)表达显著性上调,增殖相关基因(COLAA3、EGFR、GDF10)表达显著性下调(P<0.05).结论:MEPE过表达可促进hDPCs增殖、矿化与黏附相关基因表达上调,提示MEPE可能通过调控hDPCs的增殖和成牙本质分化能力,在牙髓损伤修复中发挥重要作用.
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