【摘 要】
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为改进快速检测克罗诺阪崎肠杆菌(C.sakazakii)电化学免疫传感器的灵敏度和稳定性,通过制备硫堇(TH)/纳米金(AuNPs)/辣根过氧化物酶(HRP)修饰的还原氧化石墨烯(rGO)作为
【机 构】
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浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018
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为改进快速检测克罗诺阪崎肠杆菌(C.sakazakii)电化学免疫传感器的灵敏度和稳定性,通过制备硫堇(TH)/纳米金(AuNPs)/辣根过氧化物酶(HRP)修饰的还原氧化石墨烯(rGO)作为信号放大器件,并在丝网印刷电极(SPCE)表面电沉积AuNPs,构建了一种新型的克罗诺阪崎肠杆菌夹心型电化学免疫传感器,基于HRP 对双氧水(H2 O2)的高效催化原理,实现对目标菌的定量检测,线性范围为8.8 ×104 至8.8 ×108CFU·mL-1,检出限为1.0 ×104 CFU·mL-1(S/N ＝3).对牛奶样品进行加标回收实验,回收率在92.0％至105.7％之间.进而用中性红(NR)替换HRP 对rGO 进行非酶修饰,克服酶传感器易失活的缺陷；用核壳式磁性纳米材料(IMB)替代AuNPs 修饰抗体,特异性捕获富集样品中的目标菌,提高检测稳定性和灵敏度.改进后的传感器在3.9 ×102 至3.9 ×107 CFU·mL-1 之间有良好的线性,检出限低至2.2 ×101 CFU·mL-1(S/N ＝3),稳定性从之前的30 d 信号下降13.2％提高至50 d 信号下降6.1％.并将实际样品检测数据与国标法(GB 4789.40-2010)检测结果比较,正确率高达97.4％.
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