我国于2003年正式签署《世界卫生组织烟草控制框架公约》（FCTC）,卷烟的危害性也更加受到社会公众的关注。烟碱及其代谢物是常用的烟气感受生物标志物,研究表明24 h尿样中烟碱及其主要代谢物的浓度可以评估烟碱感受量。为客观评价吸烟者与被动吸烟者对烟气的暴露程度,本研究建立了气相色谱-质谱联用法（GC-MS）对人体尿液中的烟碱及其主要代谢物（包括尼古丁、可替宁及反-3’-羟基可替宁）进行检测分析。采用固相萃取法对尿液样品进行前处理,目标物经硅烷化衍生后使用GC-MS进行检测,内标法定量。固相萃取采用3 mL的Oasis^?MCX固相萃取小柱,并对萃取条件进行了优化,包括样品溶液中缓冲溶液的pH值、洗脱溶液等。取2 mL尿样,将其与2 mL pH值为9.5的碳酸盐缓冲溶液混合,加入内标（氘代尼古丁、氘代可替宁、氘代反-3’-羟基可替宁）。取3.5 mL混合样品上样,固相萃取小柱先分别用2 mL的甲醇和去离子水进行活化,而后分别用2 mL的去离子水、1.5 M盐酸及甲醇进行淋洗,最后使用3.5 mL洗脱液（二氯甲烷:异丙醇:氨水=78:20:2）洗脱。收集液中加入50μL含1%盐酸的甲醇溶液后室温下氮吹吹干,而后用150μL乙腈复溶。复溶后的溶液中加入50μL硅烷化试剂（BSTFA,含1%TMCS）,85℃条件下衍生45 min,使用GC-MS检测。色谱分离采用安捷伦公司的DB-1701色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,方法采用程序升温,不分流进样,进样量为1μL。经测定,方法检测限为0.68⁰.84 ng/mL,方法校正曲线线性范围为5⁵00 ng/mL。以可替宁为例,其在高、中、低浓度（10、50、250 ng/mL）下日内重复性分别为4.34^,7.85%、1.78⁵.58%及2.85⁵.50%;日间重复性为6.37%、6.73%及2.09%;高、中、低浓度下可替宁的回收率分别达93.95¹08.54%、85.05⁹8.04%及83.76⁸6.96%。使用本方法可对主被动吸烟者尿液中的烟碱及其代谢标志物进行准确测定,有利于客观评价主被动吸烟者对烟气的暴露程度。