【摘 要】
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目的 建立异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)模型,寻找最适清髓的照射剂量,为研究GVHD的发病机制提供实验平台.方法分别使用Balb/c、C57BL/6小鼠作为供受者相互间
【机 构】
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浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心 杭州 310003
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目的 建立异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)模型,寻找最适清髓的照射剂量,为研究GVHD的发病机制提供实验平台.方法分别使用Balb/c、C57BL/6小鼠作为供受者相互间进行异基因骨髓移植,移植小鼠置于洁净动物房饲养,移植前一周给予含庆大霉素的饮用水,受鼠接受照射源60Co全身照射,照射总剂量分别采用6.5、7、7.5、8、8.5、9、10、11Gy,剂量率用0.8Gy/min和1.6Gy/min两种进行观测,照射方式为单次照射和分为两次照射.回输细胞中供鼠的骨髓细胞和脾细胞按1：1比例细胞数混合,通过观察受鼠的一般情况、生存期、GVHD的表现、和嵌合体情况总结合适的照射剂量.结果Balb/c小鼠作为受者时单次照射剂量大于9Gy,小鼠7天内死亡率100％,单次照射剂量为7Gy,剂量率为0.8Gy/min,30天后小鼠存活率66％,流式检测骨髓嵌合为100％供鼠骨髓(H2Kb),此剂量为较适清髓剂量.C57BL/6小鼠作为受者时单次照射剂量大于10Gy,小鼠7天内死亡率100％,单次照射剂量在7.5～8.5Gy,剂量率为0.8Gy/min,30天后小鼠存活率为25％ (3/12)～58％(7/12),骨髓嵌合为100％供鼠骨髓(H2Kd).此外我们发现将总照射剂量均分为成两次完成,中间间隔3～4小时,两类小鼠对照射的最大耐受剂量均明显增加,其中Balb/c可达到9Gy,C57BL/6可达到10.5Gy,7天以内均无死亡.结论在建立异基因移植小鼠GVHD模型时不同类型小鼠照射剂量不尽相同.照射剂量过大小鼠易死于辐射病,剂量小则不能完全清髓,为增加受鼠清髓效果同时减少照射对胃肠道黏膜损伤,照射剂量分为两次完成较好,剂量率的高低对小鼠的存活时间也有影响,剂量率0.8Gy/min对建立GVHD模型比较合适.
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