【摘 要】
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ACC氧化酶是催化乙烯合成的关键酶之一,通过NCBI在线搜索和文献查找在花生中发现25个ACC氧化酶成员。RT-PCR分析结果表明:AhACO1和AhACO2成员在花生耐盐突变体m29及诱变亲本
【机 构】
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青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术实验室; 青岛农业大学农学院/山东省旱作农业重点实验室;
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ACC氧化酶是催化乙烯合成的关键酶之一,通过NCBI在线搜索和文献查找在花生中发现25个ACC氧化酶成员。RT-PCR分析结果表明:AhACO1和AhACO2成员在花生耐盐突变体m29及诱变亲本间表达量存在明显差异。根据AhACO1和AhACO2序列设计引物,以花生耐盐突变体m29 cDNA为模板进行扩增,分别获得长度为963bp和1 319bp的序列。将AhACO1和4hACO2连接到psuper1300载体构建重组质粒psuper1300-AhACO1和psuper 1300-AhACO2,并通过花粉管注射法转化花生,收获后的荚果利用PCR扩增检测筛选出阳性籽粒。RT-qPCR检测到转基因植株目的基因的表达量明显高于非转基因对照植株;毛细管柱气相色谱法检测到转AhACO1基因植株的乙烯释放量非转基因植株的2.79倍,转AhACO2基因植株乙烯释放量为对照植株的1.87倍。对转基因植株及对照植株进行盐胁迫处理后观察其表型变化,发现转基因植株叶片萎蔫程度相对较轻,耐盐性有所增强。推测AhACO基因的过量表达提高了转基因花生的耐盐性。
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