目的 探讨护骨素对高糖环境人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及其机制.方法 (1)HUVECs分别在正糖(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖(33 mmol/L葡萄糖)、高糖+护骨素(0.5、1、2μg/ml)、高渗(5.5 mmol/L葡萄糖+27.5 mmol/L甘露醇)环境培养48 h,以流式细胞术及Hoechst 33 258核染色检测各组细胞凋亡情况,Western印迹分析各组Bcl-2、Bax蛋白表达水平；(2) HUVECs分别在正糖、高糖、高糖+护骨素(2 μg/ml)、高糖+雷帕霉素(10 ng/mL)、高糖+雷帕霉素(10 ng1/ml)+护骨素(2μg/ml)环境培养24 h,Western印迹分析各组mTORC1下游核糖体蛋白S6激酶(S6K)、p-S6K、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1 (4EBP1)及p-4EBP1蛋白表达水平;(3) HUVECs分别在正糖、高糖、高糖+护骨素(2μg/ml)环境培养24 h,Western印迹分析各组mTORC1上游马铃薯球蛋白(tuberin)、p-tuberin蛋白表达水平.结果 (1)与正糖组比较,高糖组细胞凋亡率、Bax表达水平显著增加(P＜0.05),Bcl-2表达显著降低(P＜0.05)；高糖+护骨素组细胞凋亡率、Bax表达水平明显低于高糖组,而又高于正糖组(P＜0.05),Bcl-2表达明显高于高糖组,而又低于正糖组(P＜0.05)；高渗组与正糖组比较无统计学差异；(2)与正糖组比较,高糖组p-S6K、p-4EBP1表达水平显著增高(P＜0.05)；高糖+护骨素组p-S6K、p-4EBP1表达水平明显低于高糖组,而又高于正糖组(P＜0.05)；高糖+雷帕霉素组与高糖+护骨素组比较无统计学差异；(3)与正糖组比较,高糖组p-tuberin表达水平显著增高(P＜0.05)；高糖+护骨素组p-tuberin表达水平明显低于高糖组,而又高于正糖组(P＜0.05).结论 护骨素对高糖环境HUVECs具有保护作用,其机制可能通过下调tuberin-mTORC1活性,从而实现对高糖损伤的血管内皮细胞的保护效应。
护骨素对高糖环境人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制研究
【摘 要】
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目的 探讨护骨素对高糖环境人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及其机制.方法 (1)HUVECs分别在正糖(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖(33 mmol/L葡萄糖)、高糖+护骨素(0.5、1、2μg/ml)、高渗(5.5 mmol/L葡萄糖+27.5 mmol/L甘露醇)环境培养48 h,以流式细胞术及Hoechst 33 258核染色检测各组细胞凋亡情况,Western印迹分析各组Bcl
【机 构】
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430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科,430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科,430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科,430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科
【出 处】
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中华内分泌代谢杂志
【发表日期】
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2013年29期
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