泡球蚴诱导kupffer细胞表达PD-L1抑制大鼠肝移植急性排斥反应

来源 :2015中国器官移植大会暨第二届中国器官移植医师年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzl2003cn
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目的 探讨kupffer(KCs)细胞程序性死亡配体-1(porgrammed death ligand1 PD-L1)在泡球蚴(Echinococcus multilocularis,E.m)感染抑制大鼠原位肝移植(OLT)急性排斥反应中的表达及意义.方法 皮下注射E.m 悬液建立泡球蚴感染BN 大鼠模型.3 个月后采用Kamada"二袖套法" 建立大鼠OLT 动物模型,并分为2 组,每组供受体30 只.① E.m 非感染组(A 组):LEW 大鼠→BN 大鼠.②E.m 感染组(B 组):LEW→感染E.m(E.m+)3 个月的BN 大鼠.术后各组随机取6 只观察生存天数,其余分别于OLT 术后1、3、5、7 天处死6 只取外周血及肝组织标本.HE 染色观察移植肝排斥反应分级;ELISA 法检测干扰素γ(IFN-γ)、和白介素10(IL-10)的表达,免疫组化检测PD-L1在两组移植肝脏中的表达.分离B 组术后第7 天移植肝与正常BN 大鼠肝中的KCs 及脾脏CD4+T淋巴细胞,免疫组化检测KCs PD-L1 的表达.将不同的KCs 分别与CD4+T 淋巴细胞共同培养24h,MTT 法检测CD4+T 淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测CD4+T 淋巴细胞的凋亡,ELISA 检测培养上清液中IFN-γ 和IL-10 的表达.
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