目的:建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段。 方法:针对A型流感病毒(FluA)、B型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒A型(RSVA)和B型(RSVB)的保守区序列分别设计并合成了特异性引物、探针和通用引物,构建4种病原体阳性参比品,通过对扩增和杂交条件的优化,建立了靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)和Luminex液相芯片(xMAP)技术相结合的检测系统,并对该检测系统进行了特异性、灵敏度评价。收集以急性上呼吸道感染为主要表现的患儿咽拭子标本,用上述建立的方法进行检测分析,分别与单病毒基因荧光定量PCR检测方法及xTAG液相芯片法进行比对检测。 结果:建立了IFNA、IFNB、RSVA和RSVB四种呼吸道病毒的特异性快速分子检测方法且灵敏度可达10拷贝/μL.用快速分子检测方法和单病毒基因荧光定量PCR法对120例疑似患儿咽拭子标本进行检测,快速法阳性检出率为31.7％(38/120),荧光定量法阳性检出率为29.2％(35/120).经一致性检验分析提示两种方法一致性较强(k>0.7).部分标本同时采用xTAG液相芯片试剂盒进行检测,经一致性检验分析提示两种方法一致性较好(k>0.6)。 结论:临床的初步应用证实了4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法具备灵敏、特异、快速等优点,为临床早期、准确判断呼吸道感染的病原体提供实验依据。