【摘 要】
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为研制更加安全有效且遗传背景清晰的鼠伤寒沙门菌(S.typhimurium)疫苗弱毒株.本研究首先构建了含缺失1011 bp sseK1 基因的重组自杀性质粒PREΔsseK1,利用重组自杀性质
【机 构】
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河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南 洛阳 471023
【出 处】
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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会
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为研制更加安全有效且遗传背景清晰的鼠伤寒沙门菌(S.typhimurium)疫苗弱毒株.本研究首先构建了含缺失1011 bp sseK1 基因的重组自杀性质粒PREΔsseK1,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选SL1344 的sseK1 缺失株.PCR、双酶切及测序结果表明SL1344ΔsseK1 构建成功.生物学特性初步研究表明,与亲本菌株SL1344相比,缺失株SL1344ΔsseK1 保留了亲本株SL1344 的血清型1,4,5,12：i：1,2,且能够稳定遗传缺失后的sseK1 基因,生长速度及生化特性没有发生明显改变；但小鼠毒力试验表明,SL1344ΔsseK1 缺失株口服感染6 周龄BALB/c 小鼠的LD50 为6.63 × 108 CFU,毒力较亲本株SL1344 下降至0.048％；免疫保护效力实验显示,小鼠免疫后第14 天血清抗体IgG 含量达到最高,运用鼠伤寒沙门菌野生毒株对免疫后第17 天的小鼠攻毒有62.5％的保护率.以上研究结果表明,SL1344 株sseK1 基因缺失株构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,具有较好的免疫原性,为研究sseK1 基因的致病机制及将其开发为更加安全有效的沙门菌弱毒疫苗候选菌株奠定了基础.
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