绵羊肺炎支原体贵州株16SrRNA基因的克隆与序列分析

来源 :2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weichungchen
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目的:通过绵羊肺炎支原体(Mo)贵州分离株的遗传进化特征分析,为贵州省采取针对性措施防控CCPP爆发流行提供科学依据. 材料方法:采用分子克隆技术对所分离支原体进行分子鉴定,从Mo贵州分离TZ株与WN株的DNA中扩增16S rRNA基因部分序列,连接pMD18-T克隆载体转化DH5α感受态细胞中,并进行重组质粒的PCR与酶切鉴定,通过序列比对分析比较了Mo贵州分离株与国内外其他毒株及多种支原体的遗传进化关系. 结果:Mo贵州分离TZ、WN株与标准株Y98仅各有5个碱基的差异,与国内分离MoGH3-3株同源性高达99.9%;与丝状支原体簇16S rRNA基因亲缘关系较远,而与Mcanis PG14等支原体亲缘关系较近。进一步证实了TZ、WN株为Mo。结果Mo贵州分离TZ、WN株16S rRNA基因与Mo标准Y98株间仅存在5个碱基的变异或缺失,从分子指征上再次鉴定TZ、WN株为Mo,表明了贵州省CCPP病原不仅存在Mmc,而且Mo也是致山羊发病主要病原之一。 结论:绵羊肺炎支原体(Mo)是山羊传染性胸膜肺炎主要病原之一,主要感染山羊及绵羊,表现为呼吸障碍、消瘦、高热、卧地不起等症状,病死率较高,给山羊养殖业造成严重的经济损失。自1972年首次分离鉴定Mo后,Mo已呈全球性分布,我国山东、新疆、广西等地皆有M03感染山羊的报道。16S rRNA分子是原核生物核糖体30S亚基中稳定的组分,编码的基因序列内部由保守区和可变区组成,并共存的独特分子进化格局使编码16S rRNA基因序列为微生物鉴定分类的重要科学指标。目前关于Mo基因组学的研究暂属空白,通过绵羊肺炎支原体(Mo)贵州分离株的遗传进化特征分析,佐证Mo与Mmc在免疫原性上存在差异,这将对当地采用何种疫苗,以何种免疫方式针对病原防控有重要意义。
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