【摘 要】
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目的：探讨人牙周膜成纤维细胞肿瘤坏死因子相关因子6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)在类型识别受体介导的nuclear factor-κ B(NF-κ B)信号通路调控促炎细胞因子表达的作用.方法：采用逆转录PCR(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-P
【机 构】
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四川大学华西口腔医学院 口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学);四川大学华西口腔医学院
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目的：探讨人牙周膜成纤维细胞肿瘤坏死因子相关因子6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)在类型识别受体介导的nuclear factor-κ B(NF-κ B)信号通路调控促炎细胞因子表达的作用.方法：采用逆转录PCR(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)技术、流式细胞术和免疫荧光检测人牙周膜成纤维细胞中TLR2,TLR4,NOD1和NOD2受体表达及其特异性配体刺激后,real-time PCR和western blot检测TRAF6的表达；ELISA法检测人牙周膜成纤维细胞产生的促炎因子(IL1β,IL-6,and IL-8)表达.小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默TRAF6基因,检测TLRs和NODs受体被激活后的人牙周膜成纤维细胞释放促炎因子的表达量.结果 人牙周膜成纤维细胞在基因和蛋白水平都稳定表达TLR2,TLR4,NOD1和NOD2受体.人牙周膜细胞TLR2,TLR4,NOD1和NOD2受体激活后,TRAF6和促炎因子(IL-1 β,IL6.and l L-8)的表达上调,并且呈现出时间和浓度依赖性.当TLRs和NODs信号通路被联合激活时,对于TRAF6和促炎因子的表达具有协同增强效应,而当TRAF6的表达受到抑制时,促炎因子(IL-1 β,IL-6,and IL-8)的表达量显著下调.结论：人牙周膜成纤维细胞表达的固有免疫识别受体TLR2,TLR4,NOD1和NOD2在识别口腔微生物病原体时发挥了重要的作用.激活TLRs和NODs信号通路会协同性地增强人牙周膜成纤维细胞的炎症反应.人牙周膜成纤维细胞中TRAF6作为一种信号转导蛋白,在TLRs和NODs介导的炎症反应信号通路中起到重要作用.
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