骨关节炎患者软骨下骨成骨细胞和软骨细胞的培养和鉴定

来源 :第二十届全国中西医结合骨伤科学术研讨会、第二届中国医师协会中西医结合医师分会骨伤科学术年会、第十九届浙江省中西医结合骨伤 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dna_cc
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  目的 研究培养骨关节炎患者的软骨下骨成骨细胞和软骨细胞的有效培养方法.方法 收集行全膝关节置换术的骨关节炎患者术后遗弃的胫骨平台骨组织.应用Ⅰ型胶原酶消化联合贴壁培养方法,培养软骨下骨的成骨细胞,应用Ⅱ型胶原酶消化方法,培养软骨细胞,光镜下观察细胞形态,免疫组化法分别检测Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原,NBT/BCIP染色法检测碱性磷酸酶,茜素红染色检测矿化结节,油红O染色检测脂质成分,甲苯胺兰和阿辛兰染色检测蛋白聚糖的表达.结果 通过免疫组化,NBT/BCIP染色,茜素红染色,油红O染色等检查,证实Ⅰ型胶原酶消化联合贴壁培养方法能较好的培养出成骨细胞.通过免疫组化,甲苯胺兰和阿辛兰染色,证实Ⅱ型胶原酶消化方法能较好的培养出软骨细胞.结论 Ⅰ型胶原酶消化联合贴壁培养方法是培养成骨细胞的有效方法.Ⅱ型胶原酶序列消化方法是培养软骨细胞的有效方法.
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