【摘 要】
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量子点(QDs)是近年来发展起来的一种新型半导体纳米发光材料.与传统的有机荧光染料相比,量子点具有吸收光谱宽,发射光谱窄；量子产率高,荧光寿命长,抗漂白性能强等特点.作为一种新型的单分子荧光探针,其广泛应用于化学分析、生物传感、分子成像等领域.本文主要以宽场显微成像技术为主要手段,根据聚合体中各个量子点所表现出的光谱蓝移的不同步性以及漂白的差异性(如图1),来计算团聚体中量子点的个数,从而实现对蛋
【出 处】
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第九届全国微全分析系统学术会议、第四届全国微纳尺度生物分离分析学术会议、2014国际微流控芯片与微纳尺度生物分离分析学术
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量子点(QDs)是近年来发展起来的一种新型半导体纳米发光材料.与传统的有机荧光染料相比,量子点具有吸收光谱宽,发射光谱窄；量子产率高,荧光寿命长,抗漂白性能强等特点.作为一种新型的单分子荧光探针,其广泛应用于化学分析、生物传感、分子成像等领域.本文主要以宽场显微成像技术为主要手段,根据聚合体中各个量子点所表现出的光谱蓝移的不同步性以及漂白的差异性(如图1),来计算团聚体中量子点的个数,从而实现对蛋白质的定量研究.量子点聚合体是由生物素化的量子点(QD-Biotin)和链酶亲和素(Streptavidin)特异性结合而成,随着加入链霉亲和素的浓度的不同形成各种不同团聚程度的量子点团聚体,在链酶亲和素的浓度为0-5 nM范围内,图1 量子点聚合体聚合度的测量原理量子点聚合物的平均聚合度随着链酶亲和素浓度的增加而增大,且呈线性关系(r2=0.996).这种线性关系能够检测抗凝血酶III的浓度,最低检测线为0.53 nM(图2).基于上述对蛋白质的定量关系的建立,本文还研究了量子点聚合体对生物素化的抗凝血酶III(AT-III-Biotin)的定量.此实验中,AT-III-Biotin和QD-Biotin共同竞争链酶亲和素上的结合位点,形成团聚体(图3).在抗凝血酶III的浓度为0 nM-12 nM时,随着浓度的增大,量子点团聚体的聚合度逐渐变小且呈线性关系,从而对AT-III-Biotin进行定量,其最低检测线为1.37 nM(图4).此方法能够广泛的应用于生物素化的蛋白质的检测.
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