【摘 要】
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以一株高产过氧化氢酶(Catalase,简称CAT)的枯草芽孢杆菌Bacillus sp.WShDZ-01为研究菌株,考察乙醇和过氧化氢(h2O2)胁迫对Bacillus sp.WShDZ-01产CAT的影响。通过摇瓶实验获
【机 构】
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江南大学生物工程学院生物系统与生物加工工程研究室,江苏 无锡 214122 江南大学生物工程学院,江苏 无锡 214122
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以一株高产过氧化氢酶(Catalase,简称CAT)的枯草芽孢杆菌Bacillus sp.WShDZ-01为研究菌株,考察乙醇和过氧化氢(h2O2)胁迫对Bacillus sp.WShDZ-01产CAT的影响。通过摇瓶实验获得了乙醇和h2O2的最适添加量、最适添加时间和最适添加方式,即:0h添加1.0%(v·v-1)的乙醇,总酶活达13100 U·mL-1,与对照8363 U·mL-1相比提高56.6%;在0h、12h、36h分别添加1.0%(v·v-1)的乙醇,总酶活达15000 U·mL-1,与对照6060 U·mL-1相比提高147.5%。而12h添加0.3%(v·v-1)的h2O2,总酶活达9254 U·mL-1,与对照7900 U·mL-1相比提高17.1%;在12h、24h分别添加0.15%(v·v-1)的h2O2,总酶活达9744 U·mL-1,与对照6665 U·mL-1相比提高46%。在此基础上,在3L发酵罐上重点研究了h2O2和乙醇的添加策略对菌体产酶的影响,结果表明,0h一次性添加1.0%(v·v-1)乙醇,总酶活达22000U·mL-1;0h、12h、36h分批添加1.0%(v·v-1)乙醇,总酶活达25000U·mL-1;通过分阶段恒速流加乙醇,总酶活达28000U·mL-1。12h 一次性添加0.3%(v·v-1)的h2O2 总酶活达21600U·mL-1;12h、24h分别添加0.15%(v·v-1)的h2O2总酶活达23000U·mL-1。可见3L发酵罐上应用刺激物的添加策略后,与不添加刺激物的发酵产酶水平14800U·mL-1相比,酶活有显著提高。
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