【摘 要】
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目的:探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转染乳腺癌患者树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性。方法:取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基因转移组及对照组,基因转移组感染携带BA46基因的重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo,对照组以293细胞冻融液刺激,两组细胞均采用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)诱
【机 构】
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南方医科大学附属南方医院肿瘤科 广州 510515 南方医科大学附属南方医院呼吸科 广州 5105
【出 处】
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第二届广州肿瘤大会——首届“CSCO-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会
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目的:探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转染乳腺癌患者树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性。
方法:取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基因转移组及对照组,基因转移组感染携带BA46基因的重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo,对照组以293细胞冻融液刺激,两组细胞均采用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)诱导DC前体细胞成熟。第7天。收集悬浮细胞(DC),显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析DC的表面标志CD80、CD86、CD40的表达情况;另取该DC与T细胞按1:20比例混合,含5％人血清蛋白的AIM-V为培养基,同时加入IL-2与GM-CSF,共育7天,诱导获得细胞毒性T淋巴细(CTL),取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法测量杀伤效率,同时以流式细胞仪检测CTL群体中CD8/CD4和CD8/CD56的比值。
结果:BA46基因转导的DC表面标志CD80、CD86、CD40的表达均明显高于对照组DC,所激活的T细胞对BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T有很好的杀伤效果,此杀伤具有抗原特异性和MHC限制性,且该T细胞中CD8/CD4和CD8/CD56的比值均明显高于对照组(裂解物冲击DC所激活的T细胞)。
结论:BA46基因转导成功制备DC,并诱导特异的CTL,为乳腺癌的DC基因转导疗法打下基础。
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