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mi RNA的调控作用对维持免疫系统的稳态十分重要。随着mi RNA分子的作用机制被揭示,免疫调控的研究热点逐步从转录水平过渡到转录后水平,并发现了一系列与免疫细胞、免疫疾病密切相关的mi RNA。在这些mi RNA中,mi R-146a是研究较为透彻的一个。通过对KO小鼠的研究揭示了mi R-146a在许多免疫细胞中的生理功能;而在多种自身免疫疾病的炎症损伤部位中,mi R-146a呈显著的上调表达。因此与KO小鼠相比,研究mi R-146a在炎症性疾病中的病理学功能更适宜选用mi R-146a转基因(Transgenetic,Tg)小鼠。因此,我们特别对mi R-146a Tg小鼠进行了系统的表型鉴定,并根据相关线索进一步探讨mi R-146a对机体免疫应答的调控作用,为免疫应答调控的分子机制提供新的线索。首先,我们发现Tg小鼠淋巴结和脾脏呈明显的肿大。流式细胞术检测显示,Tg小鼠淋巴结中,T细胞、B细胞以及T细胞的主要亚群(αβT、γδT细胞亚群,CD4+、CD8+T细胞亚群)的绝对数量均显著升高。此外,Tg小鼠淋巴结和脾脏中T细胞亚群相对比例也有所改变,表现为γδT、CD8+T细胞亚群比例上升,αβT、CD4+T细胞亚群比例下降。我们进一步检测了Tg小鼠胸腺中上述细胞的比例。结果显示,Tg小鼠胸腺中的γδT细胞和CD8+单阳性T细胞比例下降,这与在淋巴结或脾脏中的变化趋势恰恰相反。接下来我们利用RNA-Seq技术比较了Tg小鼠和WT小鼠中胸腺细胞的基因表达谱,结果发现有101个基因的表达水平有显著变化,并重点对54个下调表达的基因进行了生物信息学分析,发现7个与T细胞发育相关的基因,包括il7rα(cd127)和gimap4。我们进一步用Western blot或流式细胞术证明了这两个分子在Tg小鼠中的下调表达,并采用双荧光素酶报告实验mi R-146a与gimap4 m RNA 3’UTR的直接相互作用。在日常饲养Tg小鼠的过程中我们发现有10%到15%的小鼠其结肠肠壁有充血的现象并伴有腹泻,这些症状与肠炎症状类似。在DSS诱导肠炎后,我们发现与WT小鼠相比,Tg小鼠表现出更加严重的肠炎症状,这表明过表达mi R-146a会加重DSS诱导肠炎的症状及组织损伤程度。小肠上皮内淋巴细胞(Intraepithelial lymphocyte,IEL)在肠道炎症及肠道微环境的稳态中发挥重要作用,接下来我们应用流式细胞术分析了小肠IEL的细胞组成,并发现Tg小鼠的小肠IEL中γδT细胞比例明显升高,且大部分为Vγ1亚群;用抗CD3抗体联合抗CD28抗体活化Tg及WT小鼠的小肠IEL,Tg小鼠的小肠IEL促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和IL-17A分泌水平升高,而IFN-γ的分泌量则无显著改变。至此,本研究有三个重要发现:第一,系统性过表达mi R-146a可下调IL-17α和Gimap4在小鼠胸腺细胞中的表达水平,并影响γδT细胞和CD8+T细胞的发育。第二,初步证实了gimap4为mi R-146a调控的靶基因,并为IL-7Rα与mi R-146a功能联系提供了重要线索。第三,系统性过表达mi R-146a会改变小鼠IEL的细胞构成,使其促炎性细胞因子的分泌水平升高,提高了小鼠对DSS诱导肠炎的易感性。