河北安国药用植物木霉多样性及其生物学特性研究

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河北安国是我国最大的种植地和中药材集散地之一,年均总产量2700万公斤,占河北省中药材总产量的75%左右。木霉属(Trichoderma)真菌普遍存在于土壤中,且具有多种生防功能,为提高药材的质量与产量,从种植药用植物土壤中分离木霉真菌,研究木霉真菌的多样性,目的是要明确药用植物根围土壤木霉真菌的组成与分布特点,同时筛选最佳培养条件为木霉真菌提供最适生长条件以便提供真菌菌株资源。本研究在河北省安国中药材种植基地选取麦冬Ophiopogon japonicus、半枝莲Scutellaria barbata、亚麻Linum usitatissimum等26种药用植物,于2017至2019年连续三年采集药用植物根围0~30 cm土层土样,采用形态特征结合rDNA ITS序列分析方法对木霉种类进行分类鉴定,探讨木霉属真菌物种多样性、群落组成、土壤因子的生态功能以及生物学特性,主要试验结果如下:1.共分离鉴定13种木霉,包括绿色木霉Trichoderma viride、深绿木霉Trichoderma atroviride、哈茨木霉Trichoderma harzianum、短密木霉Trichoderma brevicompactum、长枝木霉Trichoderma longibrachiatum、突里巴木霉Trichoderma turrialbense、贵州木霉Trichoderma guizhouense、猬木霉Trichoderma erinaceus、康宁木霉Trichoderma koningii、黄绿木霉Trichoderma aureoviride、特里克木霉Trichoderma trixiae、棘孢木霉Trichoderma asperellum和西蒙斯木霉Trichoderma simmonsii,其中,优势种为绿色木霉、深绿木霉、哈茨木霉和短密木霉。2.不同药用植物木霉群落组成差异显著,金银花Lonicera japonica根围木霉物种分离频率最高(9.3%),共分离6种:绿色木霉、深绿木霉、哈茨木霉、短密木霉、贵州木霉和康宁木霉,香农维纳指数最高(1.089),均匀度指数小(0.778);麦冬的次之(9%),5种:绿色木霉、深绿木霉、短密木霉、康宁木霉和猬木霉,香农维纳指数为0.743,均匀度指数为0.799。3.土壤磷酸酶、有机碳和速效氮是影响河北安国样地土壤理化性质的主要变量。相关性分析结果表明,木霉真菌群落与土壤因子、多样性指数、种丰度有显著相关性。磷酸酶与土壤有机碳、速效氮、脲酶有显著正相关,速效磷与脲酶、磷酸酶有显著正相关。方差分解表明木霉多样性主要受植物种类的影响。4.绿色木霉菌丝及产孢量的最适温度均为25~40℃,最适pH为4~7,在光照条件下菌丝生长最快且产孢量最大,以葡萄糖为碳源,铵氮为氮源条件下菌丝及产孢能力最强;深绿木霉的最适温度为20~35℃、最适pH为5~9,菌丝在光照条件下生长最好,且以葡萄糖为最佳碳源、以硝氮为最佳氮源;哈茨木霉的最适温度为25~35℃,最适pH为4~8,在光照条件下生长最快,产孢最多,利用葡萄糖、铵氮;短密木霉的最适温度为20~35℃,最适pH为5~9,最佳碳氮源是葡萄糖和铵氮,且光照会促进菌丝生长产孢。
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