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目的:探讨双密达莫对流感病毒H1N1核蛋白(NP)基因的影响为防治流感提供实验依据。方法:1.培养MDCK细胞为病毒靶细胞,制备病毒,测定病毒TCID50和CPE法则药物毒性界限。2.药物抑毒试验试验分组:细胞对照组,细胞加维持液;药物对照组,细胞加药物加持液;病毒对照组,细胞加病毒加维持液;试验组,细胞加病毒加药物加维持液。试验步骤:取形成单层的细胞4瓶,弃上清,以PBS洗3次;同时加入100个TCID50流感病毒,药液稀释度为1:128。设病毒对照,药液对照和细胞对照组:每天观察细胞,待细胞产生病变时,分别收集各组细胞上清液测定,病毒血凝滴度,-70℃存放。3.提取RNA合成CDNA的操作见试剂盒说明书。4.荧光定量RT-PCR测定各组基因表达量。结论: 实验结果对照组明显高于试验(P<0.001),说明双密达莫能阻断流感病毒RNA的合成与相关文献报道一致。此研究建立的荧光定量RT-PCD方法为抗病毒药物、抗病毒核酸机理的探讨提供了又一方法,为防治流感选择双密达莫增加了分子试验依据。