【摘 要】
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[目的]小菜蛾Plutella xyllostella(L.)是为害十字花科作物的世界性重要害虫,因其已对目前使用的绝大部分农药产生了抗性,亟需开辟有效的治理新途径.气味结合蛋白(odoran
【机 构】
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福建农林大学应用生态研究所,福建福州350002;农业部闽台作物有害生物综合治理重点实验室,福建福州350002;闽台特色作物病虫生态防控协同创新中心,福建福州350002
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[目的]小菜蛾Plutella xyllostella(L.)是为害十字花科作物的世界性重要害虫,因其已对目前使用的绝大部分农药产生了抗性,亟需开辟有效的治理新途径.气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫寄主定位、选择产卵地等行为中发挥重要作用,解析小菜蛾OBP表达特性有助于阐明其嗅觉识别机制,为实现有效治理小菜蛾提供理论依据.[方法]提取并反转录不同龄期、组织的小菜蛾RNA,克隆PxylOBP2,构建原核表达载体PET28a-OBP2,在大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3)中表达.采用荧光定量PCR的方法分析PxylOBP2在不同龄期与组织中的表达模式, [结果]克隆得到了小菜蛾OBP2基因(GenBank登录号为KT070562),完整开放阅读框大小为546 bp,编码182个氨基酸,具有气味结合蛋白典型的6个保守半胱氨酸结合位点.SDS-PAGE结果显示成熟蛋白22.24kD,等电点5.69.荧光定量PCR结果表明,在卵、1～4龄幼虫、蛹、未交配成虫、交配后成虫等发育阶段中,PxylOBP2基因在雄虫中的表达量明显均高于雌虫；在四龄中肠与头部,雌、雄虫足,雌、雄虫触角,以及雌、雄虫头部等不同组织中,PxylOBP2基因在足的相对表达量最高.[结论]PxylOBP2在雄虫与足中表达量最高,推测其可能对小菜蛾寻找配偶与识别寄主有关,具体的功能有待进一步研究.
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