【摘 要】
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玉米(Zea mays L.)是世界重要的粮食与饲料作物,在我国属第一大粮食作物.河南是我国主要粮食产区之一,玉米在河南省是小麦收获后种植的最主要粮食作物.根据作者前期调查
【出 处】
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中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会
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玉米(Zea mays L.)是世界重要的粮食与饲料作物,在我国属第一大粮食作物.河南是我国主要粮食产区之一,玉米在河南省是小麦收获后种植的最主要粮食作物.根据作者前期调查结果,层出镰刀菌Fusarium proliferatum (Matsush.) Nirenberg ex Gerlach & Nirenberg是引起河南玉米穗腐病的主要病原菌,该菌对玉米的危害不仅表现在降低玉米产量上,更重要的是其产生的真菌毒素对玉米作为粮食及饲料的安全性构成严重威胁.目前尚无关于层出镰刀菌基因转化体系的系统报道,层出镰刀菌基因转化体系的构建对于研究其致病性及毒素产生相关基因有重要意义.参考前人制备尖孢镰刀菌(F.oxysporum)及禾谷镰刀菌(F.graminearum)原生质体的方法,不能得到转化所需要量级的层出镰刀菌的原生质体.因此如何获得高产率原生质体是目前影响层出镰刀菌高效基因转化体系构建的主要制约因素.本研究以玉米穗腐病病原层出镰刀菌菌株FP1为供试材料,探讨了菌株FP1原生质体制备过程中培养基种类、菌丝发育状态及酶解体系对原生质体产量影响.研究结果表明,供试菌在察氏培养基静止培养5～7d的菌丝体易于酶解.酶解过程的最佳条件是37℃、120rpm震荡处理2～3h.最佳的酶组合为3％ driselase,1％溶壁酶及0.1％几丁质酶.酶解后得到的原生质体浓度可达108个/ml.
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