乙型肝炎表面抗原免疫小鼠后不同细胞免疫测定方法的比较研究

来源 :第九次全国生物制品学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tom1313
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目的:探讨不同细胞免疫测定方法对小鼠免疫乙型肝炎表面抗原(HBsAg)后细胞免疫应答测定的影响。 方法:小鼠皮下接种HBsAg,于免疫后4、7、10、14和25 d分离脾单个核淋巴细胞(MNc),应用酶联斑点法(ELISPOT)测定MNC细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ斑点形成细胞计数(SFC),其中刺激物选择多肽和HBsAg;流式荧光检测技术(LUMINEX法)测定MNc体外经HBsAg刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5和IL-10含量。 结果: 小鼠接种HBsAg后,应用ELISPOT法测定,7 d和14 d小鼠IFN-γ阳转率分别为60%和80%;而应用LUMINEX方法测定,7d和14d小鼠IFN-γ阳转率均为80%;IL-4、IL-5、IL-10阳转率分别为60%,80%;100%,100%;80%,100%;在25d时IL-5、IL-10维持在100%,而IFN-γ和IL-4出现下降(60%)。 结论: ELISPOT和LUMINEX法测定小鼠IFN-γ应答符合一致率高,小鼠接种单针HBsAg后细胞免疫应答高峰为免疫后7-14d。
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