目的:本研究拟探讨内质网应激相关的未折叠蛋白反应(UPR)和自噬在VWM发病机制中的作用.方法:1.临床随访分析28例基因确诊的VWM患儿病程中发作性加重的临床特点;2.UPR通路的检测:将EIF2B3野生型与突变型p.1346T基因转染人少突胶质细胞系(M03.13 cell lines)，检测ER应激前及应激后2,4,8,24,48和72小时未折叠蛋白反应(UPR)通路上各分子指标的变化以及细胞凋亡和细胞活力指标，另外加入UPR促进剂salubrinal观察对细胞活力和凋亡比率的影响;3.自噬的检测:ER应激前后通过电子显微镜观察自噬小体，激光共聚焦显微镜以及western blot检测自噬体形成标志物LC31!的转化。并观察自噬诱导剂Rapamycin或自噬抑制剂3-MA对细胞凋亡和增殖活力的影响。结果:1.28例VWM患者中，20例(71.4％)病程中具有发作性加重的特点，均表现为发热或轻微头部外伤后出现运动快速倒退、惊厥或意识障碍，之后多可缓慢好转。发作性加重特点与基因型无关;2.ER应激后突变型和野生型EIF2B3过表达少突胶质细胞活力均随时间下降，其中突变组下降更明显，流式细胞术显示其凋亡逐渐增加。Western blot显示突变组UPR通路各指标如GRP78,P-eIF2a,ATF4,CHOP和GADD34，以及凋亡相关的Caspase-3均较野生型表达增加。Salubrinal干预后突变组细胞活力下降，凋亡增加;3.此外，电镜显示突变组细胞自噬体形成较野生型减少，激光共聚焦显微镜及Western blot显示LC311转化亦较野生型减少。自噬诱导剂Rapamycin及自噬抑制剂3-MA干预突变组细胞后发现3-MA组细胞活力下降，凋亡增加，而Rapamycin干预细胞活力增加。结论：发作性加重是VWM的常见临床特点，本组VWM患儿中发生率为71.4％ .ER应激后的UPR通路所引起的凋亡可能是其发作性加重的原因之一。自噬作为清除未折叠蛋白的重要途径，在带有VWM致病突变的少突胶质细胞中呈现减少的现象。因此减少ER应激后的UPR通路的过度激活以及增加细胞的自噬可以减少少突胶质细胞的凋亡以及增加其活力，可能具有保护作用。本研究结果对于本病的干预提供了初步线索。