吉林省松原地区鸟类肠道β-内酰胺耐药菌调查

来源 :第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Liudeyuan123
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本研究选取吉林省松原地区的8个候鸟品种(白骨顶鸡、凤头浅鸭、螺纹鸭、绿头鸭、雀鸭、针尾鸭、花脸鸭和红头浅鸭)和留鸟共326份肠道内容物为研究对象,采用含头孢噻肪(4μg/mL)的科玛嘉显色培养基分离培养肠道β-内酸胺耐药细菌,并对所有分离菌株进行16SrRNA基因和rpoB基因PCR扩增测序鉴定,共分离鉴定273株细菌,其中假单胞菌属82株(30%),肉杆菌属72株(26%),哈夫尼亚菌属25株(9%),水拉恩菌属21株(7%),大肠杆菌18株(6%),肠球菌属10株(4%),其它菌属45株(16%)。为了阐明耐头抱味肪分离菌株的耐药机制,本研究设计合成TEM,SHV,CTX,AmpC等耐药基因检测引物,对所有革兰氏阴性耐药菌株进行了PCR扩增,并对产物进行测序。结果表明,14株大肠杆菌同时携带TEM,SHV,CTX-M 9基因,23株哈夫尼亚菌均携带ACC基因,1株水拉恩菌携带CTX-M 9基因。研究结果表明,从本次收集的候鸟肠道内容物样品中分离的细菌为肠道常在菌群,与家畜家禽肠道常在菌群相比,候鸟肠道样品中哈夫尼亚菌和水拉恩菌比例较大,大肠杆菌比例偏小。造成该现象的原因可能与本次采样候鸟多为水禽,生活环境和食物来源与家畜家禽有较大差别,这些鸟类的采食地为远离人群的环境,其食物来源相对清洁,受到耐药菌污染的机会较少,这与家畜中携带大量ESBL表型菌有着明显的不同。耐药基因检测结果表明,分离到的假单胞菌属没有发现ESBL耐药基因,导致其产生耐头袍咪肪表型的机制可能与细菌固有耐药或其他耐药机制如外排泵或膜蛋白变异等有关。耐头袍咪肪的大肠杆菌携带多个耐药基因,是导致其耐药特性的主要原因,也表明候鸟的食物链也受到了一定的污染。本实验进一步证明所有哈夫尼亚菌属分离株均携带ACC基因,且所有ACC基因与gdha基因相连,人们已经发现哈夫尼亚菌的ACC基因为目前存在于在多种肠杆菌科中的 ACC基因的祖先,该基因在一定条件下,被插入序列切割后成为可移动的耐药基因水平传播;本实验还发现了携带耐药基因的水拉恩菌。
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