【摘 要】
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为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),本文建立了同时检测这两种病原体的多重PCR方法:参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsist2.0比较分
【机 构】
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上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
论文部分内容阅读
为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),本文建立了同时检测这两种病原体的多重PCR方法:参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsist2.0比较分析,分别筛选出TGEV、PEDVS基因相对保守区.以TGEVTH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDVCV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板,利用软件Primer3设计合成了两对寡核苷酸引物,以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板,利用所设计的两对引物进行多重RT-PCR扩增,结果同时得到与实验设计相符的499bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带,而对其它三种猪病原的扩增结果均为阴性.敏感性实验结果表明,本实验建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEVRNA和100pgPEDVRNA。
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