【摘 要】
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根据CrenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-11分离株的ORF5基因,并对其进行序列测定,同
【机 构】
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广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广州,广东,510623
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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根据CrenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-11分离株的ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-11分离株的ORF5基因克隆到含msyB伴侣基因的可溶表达载pBCX上构建重组表达质粒。结果显示,扩增获得的DNA片段约为603bp,与国内经典的CH-la株核苷酸同源性最高,为98.7％,氨基酸同源性为97.55。msyB-GP5重组表达质粒经双酶切后分为两个片段,大小与预期一致,表明已成功获得重组表达质粒。该基因的序列分析与重组表达质粒的成功构建,为对GP5蛋白的研究奠定基础。
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