目的:核酸提取是进行PCR检测成功的保证,特别是对于临床血标本中微生物核酸的提取,但有时对于荧光定量PCR,还应考虑提取方法是否对荧光定量PCR体系有影响,因而通过对用于荧光定量PCR多种真菌核酸提取方法进行比较.探索出适用于荧光定量PCR扩增的最佳真菌核酸提取方法.方法:分别采用一步裂解法、Lyticase酶消化法、玻璃珠破壁法、Biospin膜吸附法、磁珠法、浓缩裂解法、浓缩裂解结合加热法等方法对定量标准念珠菌及标准隐球菌进行DNA提取,比较DNA提取量,同时将标准株储存液用生理盐水进行10倍倍比稀释成107～100CFU/ml,分别按照上述7种方法提取DNA,以此作为PCR反应模板进行实时荧光定量PCR,并获得标准曲线,通过对每个不同浓度的标准株荧光曲线形状及各浓度荧光曲线相关性的大小进行分析.结果:7种方法DNA提取量无统计学差异，但对一步裂解法、Lyticase酶消化法、玻璃珠破壁法、Biospin膜吸附法、磁珠法、浓缩裂解法、浓缩裂解结合加热法提取真菌DNA进行实时荧光定量PCR的效果比较，浓缩裂解法和浓缩裂解结合加热法的扩增曲线呈典型的“S"型，并且浓缩裂解结合加热在检测同种真菌同一浓度时Ct值明显靠前，方差分析P <0.05，说明浓缩裂解结合加热的方法是实验比较后获得的念珠菌和新型隐球菌DNA提取并进行实时荧光定量PCR扩增的最佳方法，具有统计学意义。结论:在进行标准念珠菌及标准隐球菌荧光定量PCR检测中采用浓缩裂解结合加热获得DNA方法最佳。