平足蛋白(Podoplanin,PDPN)首次被发现在患有嘌呤霉素所诱导的肾病鼠模型的肾小球足突细胞表面上,是一种跨膜O-链接的糖蛋白,由162个氨基酸组成,大小为38kD.平足蛋白特异性表达于淋巴管内皮,不表达于血管内皮,特异性较好,可作为肿瘤诊断和判断预后的淋巴管化学标记物.而PDPN的生理功能目前还不是很清楚。但有研究表明，PDPN在肿瘤的发生、发展、侵袭和转移中发挥了重要作用，且与肿瘤预后密切相关。因此，制备高亲和力和高特异性的抗平足蛋白的单克隆抗体有助于区分淋巴管和血管，有助于对肿瘤的恶性程度、侵袭能力和预后进行判断，为临床病情评估及进一步治疗提供指导。 本研究通过合成PDPN的胞外功能区优化后的DNA片段，而后克隆到原核表达载体PET-28a(+)和PGEX-6P-1上，转到Transetta（DE3)菌株，经IPTG诱导表达、纯化得到可溶性的蛋白PDPN-GST和PDPN-HIS，并用ELISA和WB鉴定。PDPN-GST和PDPN-HIS分别作为免疫原和检测原。将多次免疫的抗血清效价达到融合要求的Balb/c小鼠的脾细胞与状态良好的SP2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞。通过多次亚克隆筛选得到阳性杂交瘤细胞株。而后进行腹水诱生抗体，纯化并鉴定抗体。该研究为建立基于免疫学检测PDPN方法和开发生产高质量的肿瘤标记物检测试剂盒奠定坚实的基础。