Proteomic analysis of purified rabies virus particles

来源 :2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangtongyue
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The rabies virus (RABV) has less genetic material and RABV replication mainly depends on host cell machinery for energy.The proliferation of the RABV in the host cell is the virus-host cell interaction and regulation.The results in our previous research showed that many host protein joined the process and integrated into the RABV virion during invading, reproduction, package and budding stage.On behalf of this background, this experiment focused on the RABV virion released from the host cell infected with RABV.Firstly, the mature RABV virion was purified with deferential centrifugation and sucrose gradient centrifugation.Then the virion was proceeded with proteomics analysis through lyqiud chromatogram and mass spectrum tandem method.The results show that 60 host proteins, along with five virus-encoded structual proteins, have been identified in the purified RABV particles, which can be classified into ten categories according to the function.To screen the special host protein, immunogold labeling, western blot and confocal laser technology were used to obtain the host protein and the location of the host protein in the RABV virion.At last RNA interference, the expression of cell line, confocal laser technology, the coprecipitation of immunity and Real-time PCR technology were used to explore the key role of the host protein in the life cycle of RABV.It will be helpful to reveal the pathogenic mechanism of RABV.
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建立了牛奶中黄曲霉毒素M1(AFM1)残留的固相萃取-超高效液相色谱(UPLC)和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法.样品经乙腈提取,Plexa固相萃取柱净化,UPLC荧光检测器或UPLC-MS/MS电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测.A1FM1在0.5~50μg/L的系列浓度范围呈线性相关,牛奶中AFM1的检测限为0.1μg/kg,定量限为0.2μg/kg.在0.1~
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