【摘 要】
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目的建立小鼠Nurr1基因的实时荧光定量PCR检测方法。方法以含有目的基因Nurr1 cDNA的质粒pEF1α-Nurr1为阳性模板,用Primer express 2.0引物设计软件设计引物,采用SYBR Green
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目的建立小鼠Nurr1基因的实时荧光定量PCR检测方法。方法以含有目的基因Nurr1 cDNA的质粒pEF1α-Nurr1为阳性模板,用Primer express 2.0引物设计软件设计引物,采用SYBR Green实时荧光定量技术建立小鼠的Nurr1基因的检测方法。同时利用脂质体转染法和G418筛选的方法建立稳定表达pEF1α-Nurr1的多巴胺能稳定细胞系。结果:当待扩增DNA浓度在1.725×10 7 cps/ml-1.725×10 10 cps/ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,相关系数r2达到了-0.9992。稳定表达pEF1α-Nurr1的多巴胺能细胞系内Nurr1 mRNA水平比未转染细胞高三倍多。结论:荧光定量PCR方法检测Nurr1基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究Nurr1的方法。
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