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目的细胞色素P450（cytochrome P450,CYP）4A及其花生四烯酸代谢产物20-羟二十烷四稀酸（20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE）在血管生成中起重要作用。本文联合计算机虚拟筛选和模式生物研究靶向CYP4A和血管生成的黄酮类化合物,试图为肿瘤治疗提供新的靶点和候选药物。方法①通过SYBYL-X 2.0软件构建CYP4A11三维模型,采用Gromacs 4.5.4软件分子动力学优化,并用Procheck和Verify 3D软件评价模型结构可靠性,对ZINC天然小分子数据库进行虚拟筛选,得到靶向CYP4A11的黄酮类化合物。②在斑马鱼胚胎血管生成模型中进一步筛选得到候选化合物。③检测外源性添加20-HETE对候选化合物抗斑马鱼胚胎和兔角膜血管生成的影响。④检测候选化合物对大鼠C6胶质瘤血管灌注、血管内皮标志CD31、周细胞标志α-SMA、组织缺氧标志HIF-1α以及20-HETE和VEGF表达的影响。⑤酶抑制实验检测候选化合物对CYP4A酶的抑制作用。结果①通过同源建模法以已知晶体结构的CYP102作为模板,构建CYP4A11三维模型。②Procheck和Verify 3D评价CYP4A11模型,结果,处于合理区域的残基氨基酸比例高达99.5%,且85.3%的残基Verify 3D分数大于0.2,高于标准阀值80%。③对ZINC数据库中的黄酮类化合物进行逐层虚拟筛选,得到20个潜在的CYP4A11抑制剂。④光甘草定、橙皮素和异甘草素具有显著抗斑马鱼胚胎血管生成活性(EC50分别为7.8、11.1、5.9μM),但这种抑制作用可被20-HETE及其类似物WIT003逆转。⑤异甘草素处理2天后显著改善肿瘤灌注并抑制肿瘤生长,在4至6天其作用更为显著。⑥异甘草素显著减少肿瘤组织中CD31-微血管密度和HIF-1α表达,增加周细胞覆盖,并降低瘤内20-HETE和VEGF水平;⑧异甘草素可显著抑制CYP4A酶活性(IC50=170 nM)。结论①通过CYP4A11三维模型虚拟筛选得到具有显著抗血管生成活性的3种CYP4A抑制剂,提示CYP4A可能是抗肿瘤血管生成的新靶点;②黄酮类化合物异甘草素可通过下调CYP4A-20-HETE系统抑制血管生成并诱导肿瘤血管正常化,可能是肿瘤治疗的候选药物。