灰绿曲霉-葡萄糖苷酶的分离纯化及性质研究

来源 :中国生物化学与分子生物学会农业分会第二届全国代表大会暨第九次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lintso1101
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灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)XC9发酵液经离心、硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析、Phenyl Seplxarose Fast Flow疏水柱层析等步骤,分离得到电泳单一纯的-葡萄糖苷酶(BG),比活力为9.7U/mg。SDS-PAGE测定表明该酶单亚基分子量约为23.5 kDa,Sephadex G-100凝胶柱层析法测得全酶分子量约为92.5 kDa,说明该酶由4个亚基组成。该酶反应最适温度在60℃且在65℃以内有较好稳定性,最适反应pH值为3.6且在pH 2.2~7.5区间稳定。该酶水解水杨苷的Km为2.58 mmol/L。测定不同化合物对酶活力的影响,结果表明金属离子K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Ba2+对酶活力无影响;Mn2+、Fe2+可以促进酶活;Zn2+可轻微抑制酶的活性;Cu2+、pb2+、Cd2+可不同程度的抑制酶活;SDS和EDTA较大程度抑制酶的活性,而酶对脲有较大抗性。
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