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目的:评价腺病毒自身的致炎作用在以其为载体的基因治疗中,对小鼠急性肺损伤(ALI)治疗效果的影响及意义。
方法:100%O2吸入诱导小鼠高氧性ALI动物模型;在100%O2吸入前48h经鼻腔通道给予装载LacZDNA的腺病毒质粒感染小鼠,并观察小鼠的死亡率。Β-半乳糖酶活性测定法用于确定转染的LacZ基因在肺脏的蛋白活性的表达水平;肺的干/湿重比、支气管.肺泡盥洗液内的蛋白浓度和细胞分类分析用于评价肺炎症反应的程度。
结果:经鼻腔通路的以腺病毒为载体的基因治疗,可造成转染基因LacZ的蛋白表达活性在肺脏持续有效的高表达,而且,其表达水平在O2吸入72 h后仍可维持为O2吸入前的2倍以上(3.688 U/mg vs 1.589 U/mg):该组小鼠对高氧吸入表现了轻度增加的敏感性和有统计学差异的50%小鼠的生存时间的较短[(86±3)hvs(94±7)h];同时,该组小鼠的支气管.肺泡内炎症细胞的渗出,在100%02吸入48 h后均明显高于对照组,继续O2吸入24h后明显下降约50%;肺干,湿重比和支气管-肺泡灌洗液内蛋白浓度无明显下降。
结论:腺病毒作为基因治疗的载体具有很强的转染和持续高效表达靶基因的能力;其病毒相关性的肺部炎症反应是轻度和暂时的,并可在达到高峰后迅速缓解。因此,在应用腺病毒为载体的基因治疗于肺部疾病的研究和实践时,应考虑腺病毒相关性炎症反应的存在,并需在评估基因治疗疗效时加以重视。