【摘 要】
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噬菌体展示技术是将外源蛋白质或多肽展示在噬菌体表面,而对应的编码基因整合在噬菌体基因组中的一项用来筛选特定蛋白质或多肽的技术.细胞穿膜肽,是一类能穿透细胞膜或核膜
【机 构】
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三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北省宜昌市西陵区大学路8号
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噬菌体展示技术是将外源蛋白质或多肽展示在噬菌体表面,而对应的编码基因整合在噬菌体基因组中的一项用来筛选特定蛋白质或多肽的技术.细胞穿膜肽,是一类能穿透细胞膜或核膜的短肽.传统的细胞穿膜肽缺乏特异性在治疗应用中大大被限制.目的:根据肿瘤细胞表面特异的分子,通过噬菌体展示方法,筛选出肿瘤细胞特异性靶向穿膜肽.方法:(1)以小鼠黑色素瘤细胞(B16)为靶细胞,用噬菌体展示技术筛选靶向B16细胞噬菌体;(2)DNA序列测定,化学合成相应的带荧光标记短肽,通过荧光显微镜或荧光定量,观察比较穿膜肽对各种细胞的穿膜能力;(3)构建穿膜肽-Apoptin原核表达质粒,诱导表达融合蛋白,Western blot、TUNEL法检测其诱导B16细胞凋亡的生物学活性.
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